作為生命科學實驗室的核心擴增設(shè)備，賽默飛VeritiPro PCR儀憑借±0.25°C孔間溫度均一性 與5°C/秒快速變溫性能 ，為病原體檢測、基因分型、表達分析等研究提供可靠支持。規(guī)范化的操作流程是確保實驗結(jié)果準確性、重復(fù)性的關(guān)鍵前提 。

一、 開機準備：環(huán)境與耗材合規(guī)設(shè)置（耗時：<5分鐘）

運行環(huán)境確認：

設(shè)備放置于穩(wěn)定水平臺面 ，散熱口預(yù)留≥10cm空間 。

環(huán)境溫度：15–30℃ | 相對濕度：≤80% | 避免強電磁干擾源。

連接穩(wěn)壓不間斷電源（UPS） 防止電壓波動中斷實驗。

啟動設(shè)備：

按下前面板電源鍵，等待系統(tǒng)自檢完成 （約1分鐘），觸摸屏顯示主菜單。

耗材選擇與裝載：

關(guān)鍵提示： 使用非認證耗材可能導(dǎo)致密封失效、導(dǎo)熱不均，影響擴增效率！ 

僅使用賽默飛認證耗材 （如MicroAmp™ 96孔反應(yīng)板、0.2mL單管）。

確認反應(yīng)板/管與熱循環(huán)模塊凹槽匹配 （避免翹曲）。

輕柔平放 反應(yīng)板至模塊中心，確保無傾斜。

二、 程序創(chuàng)建與參數(shù)設(shè)置（耗時：2-3分鐘）

新建程序：
主菜單選擇 Protocol → Create New → 輸入程序名稱（如 SARS-CoV-2_Ngene）

設(shè)置溫度步驟（核心操作）：

退火溫度： 根據(jù)引物Tm值優(yōu)化（推薦賽默飛在線工具[Primer Design Tool ]）

延伸時間： 按擴增片段長度計算（1kb=60秒）

熱蓋溫度設(shè)置（防蒸發(fā)關(guān)鍵）：

96孔板：High （高壓模式）

0.2mL單管：Low （低壓模式）

進入 Lid Temperature 選項，設(shè)置為 105°C （推薦值）。

適用耗材類型：

三、 啟動運行與實時監(jiān)控（擴增中操作）

啟動程序：

裝載樣本后關(guān)閉熱蓋，點擊 Start → 確認程序參數(shù) → 再次點擊 Start。

系統(tǒng)自動檢測熱蓋壓力，屏幕顯示 "Run in Progress" 。

運行監(jiān)控要點：

溫度追蹤： 實時顯示當前模塊溫度、目標溫度及剩余時間。

異常報警： 若出現(xiàn) "Lid Open" （熱蓋未關(guān)嚴）、"Over Temp" （超溫）告警，立即暫停檢查。

避免干擾： 運行期間勿開啟熱蓋 ，防止溫度驟變影響擴增。

四、 擴增結(jié)束與設(shè)備維護（5分鐘）

程序結(jié)束處理：

屏幕顯示 "Run Complete" 并發(fā)出提示音。

等待模塊降溫至<60°C （防止熱板燙傷或管蓋爆開）。

開啟熱蓋，佩戴防污染手套 取出反應(yīng)板/管。

設(shè)備清潔：

熱蓋底面（冷卻后）

模塊表面凹槽

儀器外殼及觸摸屏

用70%乙醇浸潤的無紡布 擦拭：

禁止使用 漂白劑、丙酮等腐蝕性溶劑！

五、 結(jié)果分析與數(shù)據(jù)管理

產(chǎn)物檢測： 按需進行凝膠電泳、熒光定量或其他下游分析。

運行記錄導(dǎo)出：

菜單選擇 Data → Export Run Log（含溫度曲線、時間戳等）

合規(guī)建議： 保存記錄用于實驗溯源（ISO 17025要求）

操作合規(guī)性要點速查表