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賽默飛 7500 實時熒光定量 PCR 系統(tǒng)使用注意事項與解決方案

更新時間:2025-09-02      點擊次數(shù):48

一、核心使用注意事項與解決方案

1. 設(shè)備放置與環(huán)境控制

問題: 環(huán)境波動導(dǎo)致數(shù)據(jù)偏差

解決方案:

溫濕度穩(wěn)定 :放置于恒溫(15-30℃)、濕度≤80%的潔凈空間,遠離空調(diào)直吹或窗戶。

避震防干擾 :獨立實驗臺放置,遠離離心機、振蕩器等振動源。

電源保護 :配置不間斷電源(UPS),防止電壓波動中斷實驗。

2. 耗材與試劑適配性

問題: 耗材不匹配影響光學(xué)檢測

解決方案:

專用耗材 :僅使用賽默飛認(rèn)證的96孔板與光學(xué)封膜 ,確保透光率一致性。

試劑驗證 :優(yōu)先選擇兼容性高的預(yù)混試劑(如TaqMan®),避免沉淀物堵塞管路。

3. 反應(yīng)體系設(shè)置與污染防控

問題: 交叉污染或體系誤差

解決方案:

分區(qū)操作 :嚴(yán)格分隔試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增分析區(qū)。

體系標(biāo)準(zhǔn)化 :反應(yīng)體積嚴(yán)格控制在20-50μL,使用校準(zhǔn)移液器分裝。

防污染措施 :實驗前后用10%次氯酸鈉溶液擦拭臺面,配套使用UDG酶防殘留污染。

4. 校準(zhǔn)與維護

問題: 信號漂移或孔間差異

解決方案:

定期校準(zhǔn) :每月執(zhí)行ROX染料校正 與光學(xué)校準(zhǔn) (使用校準(zhǔn)板)。

清潔保養(yǎng) :每批次實驗后清潔樣品槽,季度性專業(yè)維護光路系統(tǒng)。

二、7500系統(tǒng)的差異化優(yōu)勢

多色通道支持 :5色熒光通道,支持多重檢測,提升實驗效率。

智能軟件分析 :配套Applied Biosystems™軟件,自動生成Ct值/熔解曲線。

工業(yè)級穩(wěn)定性 :熱電制冷技術(shù),溫控精度±0.1℃,保障重復(fù)性。

掌握賽默飛7500實時熒光定量PCR系統(tǒng)的規(guī)范操作與維護方案,可顯著提升分子實驗效率與數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。